Цитологическое исследование — РАР тест
До настоящего времени наиболее распространенным для скрининговой диагностики патологии шейки матки является цитологический метод – цитологический мазок по Папаниколау ( РАР-тест)..
Цитологический мазок РАР – это обследование для раннего выявления клеточных изменений на шейке матки. Тест проводится путем цитологического анализа небольшого количества клеток, взятых с шейки матки и нанесенных на предметное стекло для исследования под микроскопом. Метод позволяет обнаруживать аномальные (атипичные) клетки, которые могут указывать на развитие заболевания.
Цитологическая методика была разработана в 30-е годы греческим патологом Георгом Папаниколау. В настоящее время цитологический метод исследования шеечных мазков признан классическим методом и рекомендован ВОЗ для проведения не реже, чем 1 раз в 3 года. Учитывая, что длительность перерождения папилломавирусной инфекции в рак в среднем около 10 лет, основной целью скрининга является диагностика на ранней стадии — предрака.
По мнению ВОЗ, массовое проведение цитологического скрининга в масштабах национальных программ, среди женщин в возрасте 25-64 лет с интервалом в 5 лет, позволяет снизить смертность от рака шейки матки на 84%.
Цитологическое исследование обладает чувствительностью примерно 60-80% и специфичностью — 60-85%. Основная причина ложноотрицательных результатов — человеческий фактор. Неправильный забор материала для исследовани, сопутствующий воспалительный процесс значительно затрудняют интерпретациюмазков врачом-цитологом, а иногда делают ее совершенно невозможной.
Правила забора материала для цитологического исследования:
- Забор мазков должен производиться до бимануального обследования и проведения расширенной кольпоскопии.
- Используемые инструменты должны быть стерильными и сухими (вода и дезинфицирующие растворы разрушают клеточные элементы).
- Качество цитологических мазков снижается, если после спринцевания, введения во влагалище медикаментов и полового акта прошло менее 24-х часов.
- Материал для цитологического исследования должен быть взят специальными инструментами, обеспечивающими забор с влагалищной части шейки матки, переходной зоны и нижней трети цервикального канала.
Цитологическое исследование мазков по Папаниколау выделяет следующие результаты:
1-й класс — атипические клетки отсутствуют, нормальная цитологическая картина.
2-й класс — изменение клеточных элементов обусловлено воспалительным процессом на слизистой.
3-й класс — имеются единичные клетки с изменениями соотношения ядра и цитоплазмы, диагноз недостаточно ясен, требуется повторная цитология или необходимо гистологическое исследование биоптированной ткани для изучения состояния шейки матки.
4-й класс — обнаруживаются отдельные клетки с признаками злокачественности, а именно с увеличенными ядрами и базофильной цитоплазмой, неравномерным распределением хроматина.
5-й класс — в мазке имеются многочисленные атипические клетки.
В 2008 году Гарольд цур Хаузен стал лауреатом Нобелевской премии по физиологии и медицине за открытие связи вируса папилломы человека с раком шейки матки. Цитологические критерии папилломавирусной инфекции известны довольно давно. Это койлоциты (клетки с обширной зоной просветления вокруг ядра) и дискератоциты (клетки с увеличенным темным пикнотическим ядром из поверхностных ороговевающих слоев многослойного плоского эпителия).
Койлоцит является специфической клеткой для ВПЧ инфекции, представляющий собой оксифилтноокрашенную клетку эпителия с четкими границами и ясно выраженной перинуклеарной зоной просветления и многочисленными вакуолями в цитоплазме.
Более прогрессивным методом диагностики является жидкостная тонкослойная цитология. По данным исследований, чувствительность традиционного цитологического метода может колебаться от 34,5 до 89%, чувствительность жидкостной цитологии — 71-95% , что более стабильно.
Для приготовления препаратов методом жидкостной цитологии используется система, включающая специальные щетки-кисточки — цитобраши, нефелометр и центрифугу. Цитобраши позволяют одновременно взять материал из экзо- и эндоцервикса, предотвращают его потерю и высыхание. Шеечный материал фиксируется в стабилизирующем растворе, который позволяет хранить образцы в течение 2 лет. В нефелометре материал классифицируется по плотности и дифференцируется по группам. В результате центрифугирования получаются препараты, в которых клетки располагаются одним слоем. Таким образом одного жидкостного образца можно провести комбинированную диагностику — цитологию и ПЦР-тестирование на ВПЧ.